j9九游会核酸提取或纯化试剂柱式纯化试剂盒一配方核酸提取与盒

  (19)邦度学问产权局(12)发现专利申请(10)申请发外号(43)申请发外日(21)申请号5。3(22)申请日2023。03。20(71)申请人南京腾辰生物科技有限公司地点210032江苏○省南★京市江北新区药谷大道11号性命科技岛02栋2层(72)发 现人张筝王玲王俊(74)专利代劳机构北京纪凯学问产权代劳有限公司11245专利代劳师张立娜(51)Int。Cl。C12N15/10(2006。01)◁C12Q1/6806(2018。01)(54)发现名称一种核酸提取★ 纯化试剂盒及行使技…巧(57)摘要本发现公=然 了一种核酸提取纯化试剂○盒及行使技巧。本发现供给了一种用于核酸提取纯化的试剂,搜罗细胞裂解液、消化酶、连系液、漂洗液和洗脱液;个中,所述 连系液中含有醇溶液(□如无水□乙醇)和钾 盐(如 乙酸 钾)。与市集上现有同类试剂盒比拟本发现试剂盒中的 连系液除了无水乙醇外还参与了乙酸钾试剂,该试剂的参与可○使DNA提取物高 作用拣选性吸附于离心柱硅基质膜,所得核酸的 得 率和纯□度○明显进步。本发现的试剂 /试剂盒构成大略,本钱低廉,且操作技巧浅易…核酸提取或纯化试剂 ○,便于○举 行大 ■范畴核酸提取操作,别的,本发现试剂盒中不含甲苯、二甲苯、j9九游会首页入口酚、氯仿等有毒无益试剂,对处 ○境和操作 △职○员 的妨害=较小,更合适今世化环保理念。权益恳求书2页 仿单12页附图1页CN116135975A2023。05。19CN 116135975A…1。一种用于○○核酸提取纯化 的试剂,搜罗细胞裂解液柱式纯化试剂盒纯化一配 方、消化酶、连系液、漂洗液和洗脱液,其特点正在于:所述连系液中含有 醇溶液○□和钾盐。2。凭据…权益恳求○1所述的试剂,其特点正在于:所述醇溶液为 无水乙醇或▽异=丙醇;和/或所述钾盐为乙酸钾、硫酸钾、磷酸钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾。3。凭据△权益恳求 1或=2所述=的○■□试 △ ■剂,其特点正在于:所述 连系液★由无水○乙醇和乙酸钾同 化而成,个中所述乙酸钾的 ■质料百分比 为0。1‑0。5%;所述连系液的pH为6。0‑8。0。4。凭据权益恳求1‑ 3中 …任○一○ 所述○的 试剂,胍盐、EDTA、非离■□ 子外貌活性剂▽和…◁NaCl,pH值为5。0‑8。0;和/或所述漂 洗液由漂洗 液A1和★漂洗 液A2构成;所述漂洗液A1含有盐酸胍和无水乙醇,pH值为6。0‑8。0;所述▽漂 洗液A2含★★有 K○AC、Tris○‑□HCl和无水 乙=醇,pH值为7。0‑9。0;和/或所述洗脱液中含有Tr ○is‑HCl,pH值为7。0‑9。0。5。凭据 权益恳■求4所述 的试… □剂,其特点正在于:所述裂解液的溶剂为水,溶质及浓度如下:0。5‑3。0mol/L胍盐、0。05‑0。3mol/L EDTA、体积百○○分比为3‑□10%的 非离子 外貌■= =活△ 性剂、j9九游会首页入口0。5‑3mol○/L  ★N aCl、0。05‑0。3mol/L T○ris‑HC◁l;和/或所述漂洗液 A 1的溶剂为 水,溶质及浓度如下:1‑8mol/L盐酸胍,体积★百分比■为60%‑80%的无 水乙醇;和/或所述漂洗液A2的溶剂为水,溶质及浓度如下:0。01‑1。0mol/L KAC、体积百分比为70‑80%的★无水○乙★醇、1‑10mol/L Tris‑H C■l;和/或所述洗△脱液的溶剂为水,溶质及浓度如下:2‑10mol/L Tr is‑HCl。6。凭据权益恳○求5所述的试剂,其特点正在于:正在所述裂解液中,所述胍盐为异硫氰酸胍、盐酸胍和硫氰酸■胍的起码 ★一种;和/或正在所述裂解液中,所述非离子外貌活性剂为曲拉通 △100、吐温20、SD○S和NP 40中的起码一○种;和/或=所述消化酶为卵 白酶 ○K。7。一种用于核酸提取纯化的试剂盒,其特点正在于:所述试剂盒搜=罗权益恳求1‑6中 任一所述的试剂。8。凭据权益恳求★○7所述的试剂盒,其特点正在于:所述试剂盒中还包蕴有■ 吸○附物;进一步地,所述吸附物为吸附柱。9。权益恳求1‑6中任一所述的试剂 或权益恳求7或8所述的 试剂盒正在举行核酸提取纯化中的 使用。10。一种核酸提取▽纯化技◁ 巧核酸提取或纯化试剂,搜罗如下操作步伐:S1。将待提取样本 参 与无RNA酶的离 心▽■管 中,次第参与权益恳求1‑6任一中所述的裂解权益恳求书1/2页2CN116135975A2液和权益恳求1‑6任一中所述的消化酶,盖上管盖柱式纯化试剂盒纯化一配方,瞬时离心;S2。将S1收拾= ○后的样=品金□属浴或水浴孵 育10‑20分钟后核酸提取或纯化试剂,参与连系液盖上管盖,瞬时离心;S3。将S2收拾后样品 蜕变到权 益恳求8中 所述的吸附物中,13400g离心30s至3min,弃滤液,将所述吸附物 放 接 收罗管中;S4。向所述○吸附物△中参与权益恳求1‑6任一中所□述的 漂洗液A1,13400g离心30s至3min,弃滤液,将所述吸附 物○放★接收罗管中;S5。向所述○吸附◁○物中参与 权益恳求1‑6任一中所述的漂洗液A2,13400g离心30s至3min,弃滤液,将所■述=…吸 附物放接收罗管中;S6。向所述吸△附物 中参与权益恳求1‑6任一中所述 的漂洗液A2,13400g离心2‑○4min,弃滤液,将所 述吸附○物○放 入1‑2ml EP ★ =管。j9九游会核酸提取或纯化试剂柱式纯化试剂盒纯化一配方核酸提取与纯化试剂盒